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ELISA酶聯(lián)試劑盒基本原理
發(fā)布時(shí)間： 2021-07-09 點(diǎn)擊次數(shù)： 4452次ELISA酶聯(lián)試劑盒基本原理是什么呢？
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫試劑盒)基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價(jià)結(jié)合，此種結(jié)合不會(huì)改變抗體的免疫學(xué)特性，也不會(huì)影響酶的生物學(xué)活性。
此種酶標(biāo)記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無色的還原型變成有色的氧化型，出現(xiàn)顏色反應(yīng)。
因此，可通過底物的顏色反應(yīng)來判定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng)，顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。此種顯色反應(yīng)可通過ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)檢測(cè)儀進(jìn)行定量測(cè)定，這樣就將酶化學(xué)反應(yīng)的敏感性和抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合起來，使ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫試劑盒)方法成為一種既特異又敏感的檢測(cè)方法。
一個(gè)完整的ELISA試劑盒都是有以下部分完整組成:(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品(定性測(cè)定中)，參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);
(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(6)洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(7)酶反應(yīng)終止液，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的終體積而異，在板式ELISA中一般采用3mol/L。
以上內(nèi)容就是ELISA酶聯(lián)試劑盒基本原理了。