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大鼠白介素12（IL-12/P70）ELISA試劑盒操作步驟
發(fā)布時間： 2014-07-03 點擊次數(shù)： 2272次大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 Rat Interleukin 12,IL-12/P70 ELISA Kit ，規(guī)格：96T/48T，產(chǎn)品別名： 大鼠白介素12(IL-12/P70)檢測試劑盒
大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒原理的簡要說明書：IL-12，白介素12。IL12對免疫的多向性調(diào)節(jié)作用，所具有的促進γ-干擾素分泌和增強TH1細胞的能力，使其具有抗感染、抗腫瘤和抗移植器官的功能。和大多數(shù)白介素不同的是，活性IL12是由一條重鏈(P40)和一條輕鏈(P35)構(gòu)成的二聚體。P40由嚴格限定的細胞合成，P35則很多細胞都可產(chǎn)生。但活性IL12只能由同時可合成P40、P35的細胞產(chǎn)生。這些細胞內(nèi)常常P40產(chǎn)量高于P35，以至有大量P40同聚體形成。
大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒操作步驟
1．取出酶標(biāo)板，設(shè)空白孔，依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標(biāo)準品于空白微孔中（空白孔視為0號標(biāo)準品，用醫(yī)用蒸餾水替代）
2、分別標(biāo)記樣品編號，加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中（不同的樣本采用不同的吸頭）。
3、將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘；
4、將酶標(biāo)板板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后，立即甩去液體;
5、每個孔中加滿應(yīng)用洗滌液后，輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
6、重復(fù)第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
7、在標(biāo)準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標(biāo)偶合溶液。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9、將酶標(biāo)板取出，將其中的液體甩去，每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后，立即甩去液體。
10、每個孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后，室溫輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
11、重復(fù)第5個步驟5次，在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。（A液、B液采用不同的吸頭加樣）
13、將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘。
14、每個微孔中加入50μl的終止液，輕輕振蕩混勻。
15、在酶標(biāo)儀上，450nm處測定OD; 顯色后，15分鐘內(nèi)進行測定。
16、根據(jù)制備的標(biāo)準曲線，計算樣本含量
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